Abstract
I linfociti T citotossici (CTLs) svolgono un ruolo cruciale nelle infezioni e nell’immunità antitumorale. L’induzione e l’attivazione di CTLS antigene-specifici è una strategia importante nell’immunoterapia per varie malattie e diversi ricercatori si sono concentrati sulla modulazione dell’induzione e della funzione CTL. Le cellule natural killer T (NKT) sono un’importante area di interesse dei ricercatori che studiano le risposte immunomodulatorie ai tumori e alle malattie infettive., Le cellule NKT limitate da CD1d sono costituite da cellule NKT di tipo I e cellule NKT di tipo II. – galattosilceramide (- GalCer) – le cellule NKT di tipo I attivate secernono sia citochine Th1 (ad esempio, IFN -) che Th2, influenzano l’espressione delle molecole costimulatorie nelle cellule immunitarie e regolano il sistema immunitario ospite. Le cellule NKT di tipo II, tuttavia, sono stimolate dal sulfatide, un auto-glicolipide derivato dalla mielina e svolgono un ruolo immunosoppressivo nel modello animale delle malattie autoimmuni. La generazione, l’attivazione e la soppressione di CTL sono fortemente influenzate dalle celle NKT di tipo I e II attivate., Pertanto, la regolazione di queste celle NKT porta alla modifica della funzione CTL. Le CTL contribuiscono alle risposte antimicrobiche, alle risposte immunitarie antitumorali e autoimmuni. Comprendere il ruolo delle cellule NKT nella regolazione della generazione, attivazione e soppressione di CTL consente lo sviluppo di nuove strategie di trattamento per queste malattie.
1., Introduzione
I linfociti T citotossici (CTL) costituiscono una sottopopolazione distinta dei linfociti e sono indotti da diversi stimoli, tra cui antigeni di istocompatibilità principali, antigeni proteici, virus e batteri e parassiti intracellulari. Le CTLS riconoscono i peptidi legati alle principali molecole di classe I del complesso di istocompatibilità (MHC) e l’attivazione e la proliferazione delle CTLS sono indotte dall’esposizione a antigeni specifici. I CTL attivati secernono i mediatori citolitici essenziali(perforina, granzima, ecc.,) e indurre l’apoptosi nelle cellule bersaglio (cellule tumorali, cellule infette virali, ecc.). Inoltre, i CTL attivati secernono varie citochine come l’interferone gamma (IFN-) e il fattore di necrosi tumorale alfa (TNF-), che migliorano la presentazione dell’antigene e mediano gli effetti antipatogeni. I rapporti precedenti hanno mostrato che le varie citochine come interleuchina – (IL2) o IFN producing producendo CD4 T-cells sono richieste per la generazione di immunità CTL efficace a infezione e cancro . La modulazione dell’induzione e delle funzioni CTLs è fondamentale per la progettazione di strategie efficaci contro vari virus e tumori.,
CD1d-restricted natural killer T (NKT) cellule hanno recentemente acquisito importanza come uno dei regolatori del sistema immunitario. Le cellule NKT svolgono un ruolo nelle risposte immunitarie in infezioni, tumori, allergie, malattie autoimmuni e così via. Le cellule NKT formano una popolazione linfocitaria unica che esprime sia i recettori natural killer (NK) che i recettori delle cellule T (TCR). La maggior parte delle cellule NKT utilizza un riarrangiamento della catena TCR invariante (Va14-Ja18 nei topi e V24-J18 negli esseri umani)., Gli studi sulla cellula di NKT principalmente sono stati effettuati facendo uso di-galactosylceramide (- GalCer); questo composto è stato isolato da una spugna marina e sviluppato come composto antitumorale e non è trovato in cellule di mammifero . Parecchie cellule di NKT in topi sono macchiate con α-GalCer caricato sul CD1D-tetramer. Queste cellule NKT-GalCer-reattive sono chiamate cellule NKT invarianti o di tipo I. Le cellule NKT di tipo I hanno la notevole capacità di produrre sia Th1 (ad esempio, IFN -) che Th2 (ad esempio,, IL-4, IL-10) citochine sulla stimolazione e possono successivamente aiutare ad attivare altre cellule immunitarie, come le cellule T, le cellule natural killer (NK) o le cellule dendritiche (DCs) . Le cellule NKT invarianti attivate, come altre cellule citotossiche come le cellule NK o le CTL, possono indurre la morte cellulare nelle cellule bersaglio esprimendo molecole effettrici che inducono la morte cellulare, incluso il ligando Fas (FasL) e il ligando induttore di apoptosi correlato al TNF (TRAIL) .
Alcune celle NKT limitate da CD1d non esprimono V14-J18; sono chiamate celle NKT non classiche o di tipo II., Queste cellule sono più eterogenee delle cellule NKT di tipo I in termini di utilizzo della catena TCRa e TCRß; tuttavia, producono anche citochine Th1 e Th2 sulla stimolazione del TCR . Recentemente, il sulfatide, un auto-glicolipide derivato dalla mielina, è stato segnalato per stimolare specificamente le cellule NKT di tipo II . L’iniezione di sulfatide in vivo ha fortemente impedito l’insorgenza della malattia in un modello di encefalite autoimmune sperimentale indotta da Th-1; ciò suggerisce che le cellule NKT di tipo II hanno una forte funzione immunoregolatoria. Altri studi hanno riportato il ruolo immunosoppressivo delle cellule NKT di tipo II ., D’altra parte, è stato precedentemente riportato che le cellule NKT di tipo II sono attivate in risposta agli epatociti che esprimono antigeni virali dell’epatite B in un modello di topi transgenici di infezione acuta da virus dell’epatite B. In questo modello, le cellule NKT di tipo II possono causare lesioni alle cellule epatiche e reclutare cellule infiammatorie linfomononucleate. Pertanto, le cellule NKT di tipo II possono avere la capacità di indurre l’infiammazione. Le cellule NKT (tipo I e tipo II) svolgono un ruolo critico nella modulazione immunitaria., Nel presente documento, abbiamo esaminato il ruolo delle cellule NKT nella regolazione delle risposte immunologiche, in particolare l’induzione e la funzione CTL.
2. Ruolo delle cellule NKT nell’induzione e attivazione CTL
Diversi studi hanno dimostrato che l’attivazione delle cellule NKT di tipo I è intimamente associata all’eliminazione delle cellule tumorali o di vari agenti patogeni . I CTL sono coinvolti nelle risposte immunitarie adattive e sono attori chiave nella mediazione dell’immunità contro agenti patogeni e tumori., Il miglioramento dell’induzione e dell’attivazione CTL tramite l’attivazione delle cellule NKT di tipo I provoca immunopotenziazione contro tumori o microbi. In diversi studi, IL-12 o-GalCer è stato generalmente utilizzato per attivare le cellule NKT di tipo I. L’amministrazione di IL-12 può una grande quantità di citochina Th-1 (IFN-) in modo dipendente dalle cellule NKT di tipo I. D’altra parte, le cellule NKT di tipo I attivate da-GalCer secernono sia citochine Th-1 (IFN-) che Th-2 (IL-4). Pertanto, varie sostanze stimolanti delle cellule NKT di tipo I presentano diversi modelli di produzione di citochine., Il nostro gruppo ha precedentemente valutato e confermato il ruolo delle cellule NKT attivate nell’induzione di CTL specifici per il virus dell’epatite B(HBV). Inoltre, cellule precursori CTL specifiche per HBV sono frequentemente osservate negli spleen di topi transgenici con antigene di superficie HBV (HBsAg); questi topi mostrano tolleranza immunologica all’HBsAg quando gli animali vengono pretrattati con HBsAg e-GalCer. Coerentemente con questo risultato, le risposte migliorate delle cellule T sono state osservate usando OCH, un analogo di alfa-GalCer con una catena sfingosina troncata e una ridotta capacità di indurre IFN- ., Questo rapporto ha dimostrato che l’effetto di miglioramento della stimolazione cellulare iNKT sulle risposte delle cellule T non richiede IFN-. In questa sezione, riassumiamo il meccanismo di induzione e attivazione CTL dopo l’attivazione delle cellule NKT di tipo I in risposta a vari stimoli tra cui citochine, molecole costimulatorie e cellule dendritiche (DCS). Varie citochine, molecole costimulatorie e DCS contribuiscono fortemente all’induzione e all’attivazione di CTLs (Figura 1).,
2.1. Le citochine mediano l’induzione CTL tramite l’attivazione delle cellule NKT
Le cellule T CD8-positive richiedono vari stimoli per essere pienamente attivate e per indurre differenziazione e proliferazione. Diverse citochine, molecole costimulatorie e cellule immunitarie svolgono un ruolo critico nell’induzione e nell’attivazione del CTL. Diverse citochine ricombinanti, vale a dire IL-2 , IL-4 , IL-7 , IL-10 , IL-12 , IL-15 e TNF -, sono state trovate per migliorare significativamente la produzione di CTL., L’entità del miglioramento dipende dal particolare antigene, dalle popolazioni cellulari che rispondono e dai vari ambienti. In particolare, IL-2 è stato trovato per indurre potentemente citotossicità specifica. IL-2 è risultato essere una citochina endogena importante per la produzione di CTL perché le cellule di topi con deficit di IL-2 mostrano una ridotta produzione di CTL in vitro e il trattamento con anticorpi anti-IL-2 o anti-IL-2 blocca la produzione di CTL. Recentemente, Lin et al. ha anche dimostrato che il vaccino DNA codificante una fusione di proteine IL-2 e E7 ha generato la più alta frequenza di cellule T CD8+ specifiche di E7 in vivo ., IL-2 sembrava essere una citochina critica per l’induzione CTL in vivo. Abbiamo precedentemente riportato che l’attivazione delle cellule NKT di tipo I promuove fortemente la proliferazione di CTLS specifici per HBsAg attraverso la produzione di alti livelli di IL-2. Il miglioramento della produzione di IL-2 è stato osservato almeno 24 ore dopo la somministrazione di-GalCer. Sebbene la produzione di IL-2, IL – 4, IFN-e TNF aumentasse dopo la somministrazione di GalCer, il contributo di IL-2 era significativamente superiore a quello di altre citochine (IL-4, IFN-e TNF-) nel miglioramento della produzione di CTL., Il blocco del segnale del recettore IL-2/IL-2 ha portato ad un’inibizione della produzione di IFN – e IL-12 da parte di DC e alterata attività stimolatoria delle cellule T. Il segnale del ricevitore IL-2/IL-2 contribuisce alle varie citochine che svolgono un ruolo importante nell’induzione di CTL. Un altro rapporto ha mostrato che l’attività adiuvante di-GalCer si perde nei topi privi del recettore IFN . Questi dati indicano che gli IFNS sono importanti per mediare l’effetto adiuvante di-GalCer., L’IFN – secreto dalle cellule NKT e/o NK agisce sulle cellule presentanti l’antigene (APC) sovraregolando il macchinario di elaborazione MHC di classe I o migliora la risposta immunitaria mediata da APCS acquisita agendo direttamente sulle cellule T CD8-positive antigene-specifiche. Moreno et al. ha mostrato che l’anti-IFN-anticorpo inibisce il miglioramento dell’induzione CTL da-GalCer . La produzione di IL-12 da APCs inoltre è migliorata dall’attivazione delle cellule di NKT che segue l’interazione del legante CD40-CD40 (L)., Le cellule NKT di tipo I colmano le risposte immunitarie innate e adattive stimolando la produzione di CTLS in modo IFN– e / o IL-12-dipendente .
2.2. I segnali costimulatori mediano nell’induzione CTL attraverso l’attivazione delle cellule NKT
L’attivazione delle cellule T CD8-positive si verifica quando le cellule naïve incontrano gli APC; questa attivazione dipende da () il numero di complessi MHC presenti sugli APC e l’affinità dei TCR per i complessi MHC e () i segnali forniti dagli APC sotto forma di molecole costimulatorie., Le vie costimulatorie B7 / CD28 e CD40 / CD40L sono le vie di interazione costimulatoria meglio studiate che contribuiscono all’attivazione e alla produzione delle cellule T. L’attivazione delle cellule di NKT da-GalCer può upregulate le molecole costimulatory (CD40, CD80 e CD86) sia nei sottoinsiemi di CD8+ che di CD8− DC . Questo miglioramento della regolazione costimulatoria è necessario per la funzione adiuvante di-GalCer in vivo., Per quanto riguarda il ruolo dei segnali costimulatori nelle funzioni delle cellule NKT, le molecole costimulatorie tra cui CD28, ICOS, CD40 e 4-1BB sono note per promuovere l’attivazione indotta da Ag e la produzione di citochine da parte delle cellule NKT . Hayakawa et al. ha mostrato che le risposte di tipo Th1 indotte da GalCer, rappresentate da una maggiore attività citotossica delle cellule mononucleate spleniche o epatiche e da un effetto antimetastatico, erano compromesse sia nei topi CD28-carenti che CD40-carenti ., Al contrario, le risposte di tipo Th2 indotte da-GalCer, rappresentate da un aumento dei livelli sierici di IgE e I1, sono state compromesse in assenza della via costimulatoria CD28 ma non in assenza della via costimulatoria CD40. Questi dati hanno indicato che sia l’interazione CD40/CD40L che CD28/B7 svolgono un ruolo fondamentale nella promozione della CTL indotta da-GalCer. Pertanto, queste molecole costimulatorie contribuiscono all’attivazione delle cellule NKT di tipo I e all’attivazione e alla produzione di CTLS.,
Un precedente rapporto ha dimostrato che la somministrazione concomitante di OVULI e-GalCer ha portato ad un aumento significativo delle cellule T CD8 specifiche di OVA257-264 rispetto a quella degli animali trattati con OVULI e veicoli da soli . Questi risultati hanno indicato che i livelli di cross-presentation sono stati marcatamente aumentati dalla stimolazione concomitante dell’attività delle cellule iNKT. Il miglioramento della presentazione incrociata in APC può anche aumentare le risposte antigene specifiche delle cellule T.
Gli MHC e il processo di presentazione dell’antigene stanno attualmente guadagnando ampia attenzione nel campo dell’immunologia., Il sistema immunitario contiene un gruppo distinto di cellule che presentano l’antigene chiamate DCS, che sono specializzate per la cattura degli antigeni e l’induzione dell’immunità delle cellule T. Diversi studi meccanicistici hanno rivelato l’importanza delle DCS nella produzione di CTL . CD40L e TNF-sono due degli stimoli più potenti per la maturazione DC. I DCs maturi esprimono alti livelli di CD40, mentre le cellule T attivate esprimono CD40L. Pertanto, una riuscita interazione tra cellule T e DC dovrebbe consentire una sopravvivenza prolungata dei DCs tramite l’interazione CD40/CD40L.,
-GalCer upregulates espressione CD40L sulle cellule di tipo I NKT e media la maturazione e l’attivazione di DCs per produrre IL-12 . IL-12 di DCs attiva le cellule NKT di tipo I per produrre IFN -, che a sua volta stimola le cellule NK e la citotossicità mediata da CTL . Inoltre, le cellule NKT attivate da α-GalCer inducono anche la maturazione di DCS, che contribuisce alla sovraregolazione delle risposte Th1 . Questa sovraregolazione delle risposte Th1 promuove il prodotto CTL., In precedenza abbiamo convalidato i fattori che svolgono un ruolo critico nell’aumentare il numero di CTL specifici per HBV dopo la somministrazione in vivo dell’antigene HBV e-GalCer . L’interazione CD40-CD40L ha svolto un ruolo fondamentale nel promuovere la produzione di CTL tramite l’attivazione delle cellule NKT di tipo I.
3. Ruolo delle cellule NKT nella soppressione CTL
Diversi rapporti hanno indicato che le cellule NKT svolgono anche un ruolo soppressivo nella regolazione dell’immunità. Inoltre, questa azione immunosoppressiva delle cellule NKT di tipo I e di tipo II può anche influenzare la produzione e l’attivazione di CTL., Questa sezione si concentra sugli effetti di diverse citochine, come IL-4, IL-13 e il fattore di crescita trasformante beta (TGF -) e diverse molecole costimulatorie, come l’antigene associato ai linfociti T citotossici(CTLA-4), la morte programmata (PD)-1 e il gene di attivazione dei linfociti(LAG-3), sulla soppressione della produzione e dell’attivazione di CTLs (Figura 1).
3.1. Le citochine mediano la soppressione CTL
IL-4, IL-13 e TGF – sono noti per sopprimere la risposta immunitaria e sono attivamente secreti all’attivazione delle cellule NKT., TGF-ha forti effetti inibitori sul sistema immunitario e influisce negativamente su molti tipi di cellule immunitarie e sulle loro funzioni ; I topi TGF-1-carenti contengono cellule T attivate spontaneamente e muoiono a causa di una massiccia infiammazione degli organi vitali . Il blocco di TGF – da un anti – TGF-anticorpo ha potenziato sinergicamente l’efficacia del vaccino tumorale; questa protezione è stata mediata da cellule T CD8-positive . Pertanto, TGF – può sopprimere l’immunità tramite la compromissione della funzione CTL. – La somministrazione di GalCer nei topi è nota per indurre epatite moderata .Zhou et al.,recentemente foundthat commercio -GalCer derivati, -galattoside-C18-ceramide (-Gal-C18-Cer) identica a -GalCer tranne 1 doppio legame in sfingosina catena laterale in una posizione simile a quello trovato in isoglobotrihexosylceramide (iGb3) , attiva epatica di tipo I, le cellule NKT (come risulta da IFN – produzione), ma non indurre biochimica epatite, anche per via endovenosa a dosi fino a 40 g/mouse. In questo modello sperimentale, l’attivazione di cellule NKT di tipo I da parte di-Gal-C18-Cer provoca il reclutamento di TGF producing producendo cellule T Foxp3+ CD4-positive nel fegato., Un altro rapporto ha dimostrato che-Gal-C18-Cer aumenta marcatamente il livello di CXCR3 epatico sul dependentmannerof cellule NKT . L’aumento dell’espressione CXCR3 recluta cellule T regolatorie CXC3-positive. Pertanto, – Gal-C18-Cer può potenzialmente sopprimere CTLs tramite il reclutamento di cellule T regolatorie.
In un modello di fibrosarcoma, in cui il tumore si ripresentava nel sito della sfida tumorale in seguito alla crescita tumorale primaria e alla regressione spontanea, la funzione CTL contro il tumore era compromessa dalle cellule T CD4-positive ., Queste cellule T CD4-positive soppressive sono state trovate per essere cellule NKT IL-13-producenti CD1D-limitate . I topi knockout CD1d (KO) erano altamente resistenti al tumore e la secrezione di IL-13 da parte delle cellule T era significativamente ridotta in questi modelli di topi. Ciò era coerente con la scoperta che le cellule NKT CD4-positive da topi portatori di tumori regolano la produzione di IL-13. Questi risultati hanno chiaramente indicato che le cellule NKT CD4-positive sono la principale fonte di IL-13 nei topi portatori di tumori perché le cellule T CD4-positive dei topi con deficit di cellule NKT producono livelli molto bassi di IL-13., IL-13 secreto dalle cellule NKT è pensato per compromettere l’attivazione CTL. IL-13 inoltre induce la produzione di TGF – dalle cellule mieloidi-derivate e TGF-β sopprime CTLs. Studi recenti hanno riportato che queste cellule NKT CD4-positive CD1d-restricted sono cellule NKT di tipo II . Le cellule NKT di tipo II hanno riarrangiamenti del gene TCR variabili distinti da quelli delle cellule NKT di tipo I; inoltre, le cellule NKT di tipo II vengono attivate dopo la somministrazione di sulfatide . L’attivazione delle cellule NKT di tipo II da parte del sulfatide previene l’encefalomielite autoimmune sperimentale e l’epatite indotta da concanavalin A., La protezione mediata dal sulfatide dalle malattie autoimmuni comporta la regolazione delle cellule NKT di tipo I, l’inibizione delle funzioni effettive delle cellule T convenzionali e la modifica della funzione DC. Le funzioni CTLs sono anche compromesse dall’inibizione delle cellule T convenzionali e delle funzioni DC. Pertanto, l’attivazione di cellule NKT di tipo II da parte di sulfatide può essere utile nello sviluppo di nuove strategie per il trattamento di malattie autoimmuni associate a CTLS attivato.
Le cellule NKT di tipo I che possono secernere fortemente citochine Th2 contribuiscono anche all’immunosoppressione., Le cellule NKT derivate dal midollo osseo potrebbero inibire la graft versus Host disease (GVHD) in un modello murino . Lo stesso gruppo ha riportato risultati simili utilizzando un modello diverso di soppressione GVHD . In entrambi gli studi, l’inibizione della GVHD dipendeva dalla capacità delle cellule NKT di produrre IL-4. È stato trovato che la produzione di IL-4 da parte delle cellule NKT domina la risposta della soppressione della GVHD e quindi contrasta il potenziale effetto delle citochine Th1 su queste cellule, almeno in questi modelli.
Il rapporto precedente indicava che-GalCer impedisce lo sviluppo nei topi diabetici nonobesi (NOD)., I topi NOD hanno cellule funzionali V14 NKT che possono essere stimolate con-GalCer per potenziare le risposte immunitarie Th2 (IL-4, IL-10). Inoltre, Beaudoin et al. ha dimostrato che le cellule NKT di tipo I possono inibire la differenziazione delle cellule T naïve in effettori Th1 e questa inibizione è stata abbastanza forte da bloccare lo sviluppo del diabete . L’attivazione delle cellule NKT di tipo I potrebbe essere utile per l’intervento terapeutico in malattie umane caratterizzate da patologia Th1-mediata come il diabete di tipo 1.
3.2., I segnali costimulatori mediano la soppressione CTL
L’attivazione delle cellule T viene indotta sulle interazioni B7CD28 o CD40 / CD40L per fornire segnali costimulatori. Rapporti recenti hanno rivelato che diverse molecole aggiuntive sugli APC forniscono segnali costimulatori. Queste molecole di segnalazione possono essere effettori positivi o molecole inibitorie e il cambio di paradigma dall’attivazione delle cellule T alla tolleranza dipende dall’integrazione delle miriadi di interazioni tra varie molecole di superficie cellulare e dai loro effetti sulle decisioni sul destino delle cellule., Molte di queste proteine, come CTLA-4, PD-1 e LAG-3, e il loro effetto sull’induzione della tolleranza delle cellule T in CTLs devono essere studiati.
CTLA-4 è un membro della famiglia del ricevitore CD28 ed è una molecola inibitoria che sopprime l’attivazione delle cellule T. CTLA-4, come CD28, si lega alle molecole B7, ma con un’affinità che è 20-50 volte superiore a quella di CD28 . L’espressione superficiale di CTLA-4 è sovraregolata in cellule T attivate, presumibilmente come parte di un normale ciclo di feedback negativo per terminare l’attivazione., L’inibizione dell’attività CTLA-4 utilizzando anticorpi bloccanti contro CTLA-4 impedisce l’anergia nelle cellule T CD4-positive in diversi modelli in vivo; ciò implica che CTLA-4 è una molecola importante coinvolta nell’induzione dell’anergia. Tuttavia, CTLA-4 non è probabilmente richiesto per l’induzione di anergia nelle cellule T CD8-positive, perché le cellule T 2C dei topi CTLA-4 KO sono ugualmente sensibili all’anergia come le cellule T dei loro compagni di letteratura wild-type. Inoltre, la tolleranza contro gli antigeni tissutali espressi su cellule prive di molecole B7 potrebbe spiegare la tolleranza delle cellule T CD8-positive indipendenti da CTLA-4., Pertanto, questi risultati sottolineano le potenziali differenze meccanicistiche nell’induzione della tolleranza tra cellule T CD4-positive e CD8-positive. Il contributo delle cellule NKT di tipo I è stato recentemente studiato in un modello murino di cancro trattato con radioterapia e blocco CTLA-4 . Rispetto ai topi wild-type, i topi KO con cellule NKT di tipo I hanno mostrato tassi di sopravvivenza e cura marcatamente elevati dopo la radioterapia e il blocco CTLA-4; ciò suggerisce che le cellule NKT di tipo I possono svolgere un ruolo importante nella regolazione della risposta al trattamento.,
PD-1 è un altro importante recettore inibitorio che è stato implicato nella tolleranza delle cellule T e nell’autoimmunità . PD-1 è un ricevitore inducibile trovato sulle cellule T ed è stato indicato per downregulate l’attivazione delle cellule T e lo sviluppo delle funzioni effettrici. I ligandi che si legano a PD-1, cioè PD-L1 e PD-L2, sono stati identificati sulla base della somiglianza della sequenza con le comuni molecole B7. PD-L1 è ampiamente espresso su cellule di origine ematopoietica e parenchimale, mentre l’espressione PD-L2 è più strettamente regolata ed è osservata su macrofagi e DCS ., Diversi studi hanno convalidato che l’interazione PD-1/PD-L1 è cruciale per lo sviluppo della tolleranza nelle cellule T CD8-positive. Inoltre, la deplezione di PD-1 porta ad un aumento del numero assoluto di cellule T CD8-positive, indicando così che PD-1 media la tolleranza riducendo la proliferazione delle cellule T. Le cellule T innescate in assenza di interazione PD-1/PD-L1 secernono attivamente anche citochine e producono granzimi . Questi risultati indicano che PD-1 genera tolleranza alle cellule T autoreattive riducendo la proliferazione e la differenziazione delle cellule T CD8-positive., Il blocco delle interazioni PD-1/PD-L durante il trattamento α-GalCer impedisce l’induzione dell’anergia delle cellule NKT di tipo I, preservando così l’attività terapeutica di queste cellule contro i tumori B16 . Le cellule NKT di tipo I nei topi PD-1-carenti trattati con GalCer hanno anche mantenuto la loro attività antimetastatica. In precedenza, è stato riferito che una singola somministrazione di-GalCer induce la mancanza di risposta delle cellule NKT a lungo termine nei topi. Le cellule NKT non sono riuscite a proliferare e produrre la restimolazione IFN – upon-GalCer ., Pertanto, – GalCer che ha indotto l’attivazione delle cellule T convenzionale scompare anche da questa anergia delle cellule NKT. Uno studio recente rivela che l’interazione PD-1/PD-L1 è essenziale per l’induzione e il mantenimento dell’anergia cellulare iNKT . Il blocco dell’interazione PD-1/PD-L1 può aumentare l’induzione della risposta CTL antigene-specifica mediante stimolazione GalCer. Akbari et al. ha studiato il ruolo di PD-L1 e PD-L2 nella regolazione delle cellule NKT di tipo I-iperreattività delle vie aeree mediate dalle cellule (AHR) in un modello murino di asma ., La gravità dell’AHR e l’infiammazione delle vie aeree erano significativamente maggiori nei topi PD-L2 KO rispetto ai topi wild-type dopo sensibilizzazione all’ovalbumina e somministrazione di sfida o GalCer. Le cellule NKT di tipo I ottenute da topi PD-L2 KO hanno prodotto significativamente più IL-4 rispetto a quelle ottenute da topi di controllo. Questi risultati suggeriscono che l’interazione PD-1 o PD-2/PD-L è importante per indurre l’anergia nelle cellule NKT di tipo I attivate. Questa anergia può comportare la compromissione della produzione e dell’attivazione di CTL.
4., Conclusione
Il concetto di modulazione immunitaria si basa sull’idea che il sistema immunitario ospite svolge un ruolo critico nel promuovere la protezione dell’ospite contro gli agenti patogeni o il cancro. In particolare, le CTL svolgono un ruolo centrale nell’esclusione di agenti patogeni intracellulari o cellule tumorali e la modulazione della produzione o dell’attivazione di CTL è utile per controllare la malattia. Le cellule NKT hanno due funzioni opposte: funzioni immunoattive e immunosoppressive., Le cellule NKT di tipo I e di tipo II presentano queste funzioni immunoregolatorie e un controllo di queste funzioni bipolari delle cellule NKT è necessario per un’immunoterapia efficace contro l’infezione virale cronica, il cancro e le malattie autoimmuni.
